Test du systeme API 20e

Analyses du metabolisme bacterien des enterobacteries gram negatif

Test a l'oxydase (presence de cytochrome C membranaire). Ce test est positive chez les bacteries aerobies strictes et negative chez les anaerobies facultives (enterobacteries).

Apres l'incubation du API 20E avec les cultures bacteriennes, il faut ajouter des reactifs a 3 puits pour les visualiser:

  1. Ajouter une goutte de ferric chloride au puit TDA (tryptophan deaminase).
  2. Ajouter une goutte du reactif de Covax ou James au puit IND (indole).
  3. Ajouter une goutte de 40% KOH et une goutte d'alpha-napthal au puit VP (acetoine) et attendre 10 minutes. Attention ces reactifs sont tres toxiques!

Voici une bonne Video sur l'interpretation du API 20E.

Lectures des tests API 20E

  1. ONPG (1 pt): clivage des polymers de galactose par beta-galactosidase. jaune=positif.
  2. ADH (2 pts): degradation d'arginine par arginine dehydrogenase. rouge=positif, jaune=negatif.
  3. LDC (4 pts): degradation de lysine par lysine decarboxylase. rouge=positif.

  4. ODC (1 pt): ornithine decarboxylase. rouge=positif.
  5. CIT (2 pts): utilisation de citrate comme source de carbone. bleu=positif, vert=negatif.
  6. H2S (4 pts): production de l'hydrogene sulfure, S04 -> H2S. noir=positif, clair=negatif.

  7. URE (1 pt): urease, utilisation d'urea comme source de l'azote. urea -> CO2 + NH4. rouge=positif, clair=negatif.
  8. TDA (2 pts): utilisation de tryptophane par tryptophane deaminase: tryptophane -> indole + pyruvate + NH4. rouge=positif, marron=negatif.
  9. IND (4 pts): production d'indole. rouge/rose=positif, clair=negatif.

  10. VP (1 pt): production d'acetoine. rouge=positif, clair=negatif.
  11. GEL (2 pts): synthese d'une gelatinase. noir=positif, granules=negatif.
  12. GLU (4 pts): oxidation de glucose. jaune=positif, bleu=negatif.

  13. MAN (1 pt): oxidation de mannitol. jaune=positif, bleu=negatif.
  14. INO (2 pts): oxidation d'inositol. jaune=positif, bleu=negatif.
  15. SOR (4 pts): oxidation de sorbitol. jaune=positif, bleu=negatif.

  16. RHA (1 pt): oxidation de rhamnose. jaune=positif, bleu=negatif.
  17. SAC (2 pts): oxidation de saccharose. jaune=positif, bleu=negatif.
  18. MEL: (4 pts) oxidation de melibiose. jaune=positif, bleu=negatif.

  19. AMY (1 pt): oxidation de amygdalin. jaune=positif, bleu=negatif.
  20. ARA (2 pts): oxidation d'arabinose. jaune=positif, bleu=negatif.
  21. OX (4 pts): Test a l'oxydase (ci-dessus).

Vous utilisez les points pour calculer un nombre a 7 chiffres qui permets l'identification de la souche bacterienne sur ce site apiweb.

Voici un fichier simplifé pour identifier les gram negatives. "ND" veut dire que ce test ne donne pas d'information.